更新时间:2022-08-30
【预期用途】仅供科研使用,本试剂盒用于测定相关样本中植物线粒体呼吸链复合体Ⅱ(MRCCⅡ)ELISA试剂盒-活性含量。
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【样本要求】
1.样本类型和采集
血清:将收集于血清分离管的全血标本在室温放置0.5-2小时或4℃过夜,然后1000×g离心20 分钟,取上清即可,或将上清置于仅供科研使用,不得用于临床诊断。-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
血浆:用EDTA或肝素作为抗凝剂采集标本,并将标本在采集后的30分钟内于2-8℃ 1000×g离心15分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。组织匀浆:用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织,去除残留血液(匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果),称重后将剪碎的组织与对应体积的PBS(一般按1:9的重量体积比,比如1g的组织样品对应9mL的PBS,具体体积可根据实验需要适当调整,并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂)加入玻璃匀浆器中,于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞,可以对匀浆液进行超声破碎,或反复冻融。最后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。细胞裂解液: 吸弃培养液,用 PBS(0.01 M,pH 7.4)将细胞洗一遍。用细胞刮刮下细胞(不能用胰酶和 EDTA 处理),加入 2-5mL PBS(0.01 M,pH 7.4)。悬浮细胞可省略。收集细胞悬液,4℃1000×g 离心 10min,弃去培养基,用预冷的 PBS 润洗 3 次。加入适量的预冷 PBS 或非变性细胞裂解液(临用前加入蛋白酶抑制剂)重悬细胞,通常 6 孔板一个孔的细胞量需要 150-250μL PBS 重悬。 将样品放入-20℃或-80℃,使样品冷冻,再放室温解冻样品,反复冻融 3 次,使细胞充分裂解,也可将样品进行超声破碎,以达到裂解的目的。4℃ 10000×g 离心 10min,除去细胞碎片,取上清即可检测,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。细胞培养物上清或其它生物标本:请1000×g离心20分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。.样本保存和稳定性样本在 2-8℃条件下,可以储存 72h,在- 20℃或-80℃可以储存6 个月及以上。样本收集后,不是一次检测完,请按一次用量分装冻存,避免反复冻融