技术文章您现在的位置:首页 > 技术文章 > 恒远生物为大家分享胎牛血清正确的存放和解冻

恒远生物为大家分享胎牛血清正确的存放和解冻

更新时间:2024-04-28   点击次数:470次

胎牛血清在科研市场上应用广泛,但对于胎牛血清的使用及保存,有一部分人可能不是很清楚,下面恒远生物把胎牛血清的储存、常见问题以及处理方法分享给大家。


一、不使产品质量受损的储存和解冻血清

未拆封的血清,一般情况下应存放于-10℃至-20℃,在产品规定的效期内均可使用,若一次无法用完一瓶,建议无菌分装血清至合适大小的无菌离心管内,再放回冷冻。将血清从冷冻冰箱取出后,先置于2~8℃冰箱使之融解,然后在室温下使之全融,或通过水浴锅促使其溶解。

注:融解过程中必须规则地摇晃均匀。溶解后建议尽快使用,若长时间储存在2-8℃,血清中的各种(脂)蛋白(如冷凝集素、纤维蛋白原、玻粘连蛋白等)可能因凝集而形成沉淀或可见的混浊。

二、血清中的絮状沉淀是什么应该如何处理

1.将冷冻保存的血清取出后,置4℃冰箱静止过夜。

2.待血清融化后,上下颠倒,轻轻混匀,继续4℃2~3小时。

3.轻轻吸取上层血清,分装,余底下50ml左右。

4.低速离心5分钟,去掉沉淀。

三、如何处理解冻后出现的絮状沉淀物

1.胎牛血清中沉淀物出现的原因有许多种,但普遍的原因是由于胎牛血清中脂蛋白的变性造成,而血纤维蛋白(形成凝血的蛋白之一)在胎牛血清解冻后,也会存在于胎牛血清中,亦是造成沉淀物的主要原因之一。(这些絮状沉淀物,并不影响胎牛血清本身的质量。)

2.若想去除这些絮状沉淀物,可将胎牛血清分装至无菌离心管内,以400g稍微离心,上清液即可接着加入培养基内一起过滤。(不建议以过滤的方式去除絮状沉淀物,会有阻塞过滤膜的可能)。

3.解冻胎牛血清时,按照所建议的逐步解冻法(-20℃至4℃至室温),若胎牛血清解冻时改变的温度太大(如-20℃至37℃),实验显示非常容易产生沉淀物。(解冻时均匀摇晃胎牛血清,减少沉淀的发生)。

4.请勿将胎牛血清置于37℃太久,因为会导致胎牛血清变得混浊,同时胎牛血清中许多较不稳定的成分也会受到损害,影响胎牛血清的质量。胎牛血清的热灭活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,即无须做此步骤。若必须做胎牛血清的热灭活,请遵守56℃,30分钟的原则,并且随时摇晃均匀。

四、如何避免血清中产生沉淀

1.解冻时,请随时将之摇晃均匀,使温度及成分均一。

2.分装冻存时,须规则摇晃均匀(勿造成气泡)。

3.切勿由-20℃直接至37℃水浴锅解冻,较大的温差,易造成蛋白质凝结而发生沉淀。

4.切勿将血清置于37℃过长时间,否则可能使之浑浊,其中一些不稳定的组分也会因此受到影响,终降低血清的品质。

5.血清的热灭活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,即无须做此步骤。

6.若必须做血清的热灭活,请遵守56℃,30分钟的原则,并且保持摇晃均匀。温度过高、时间过久或摇晃不均匀,都会造成沉淀物的增多。