人β连环蛋白/联蛋白elisa试剂盒

产品名称：人β连环蛋白/联蛋白      
英文名称：Human β catenin,β-Cat ELISA KIT 
产品规格：96人份/48人份  
检测方法：酶联免疫法/酶免法（ELISA）   
经营种类：进口分装和原装   
主要作用：科研   
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保存条件及有效期
1．试剂盒保存：2-8℃。
2．有效期：6个月
运输条件低温运输，用干冰或者冰袋低温运输。 
 

This antibody is specific for the MDR1 isoform of P Glycoprotein. It does not cross-react with MDR3. It has been shown to cross-react with Pyruvate Carboxylase, an abundant mitochondrial enzyme （130 kDa）, on both immunoblots and immunohistochemical tissue sections. Weak homogeneous, cytoplasmic, or granular patterns of reactivity may represent staining of the PC cross-reactive epitope rather than positive staining for P glycoprotein.

操作步骤
     方法一　用于检测未知抗原的双抗体夹心法:
　　1.　包被：用0.05M PH9.牰碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为1～10μg／ml。在每个聚苯乙烯板的反应孔中加0.1ml，4℃过夜。次日，弃去孔内溶液，用洗涤缓冲液洗3次，每次3分钟。（简称洗涤，下同）。
　　2.　加样：加一定稀释的待检样品0.1ml于上述已包被之反应孔中，置37℃孵育1小时。然后洗涤。（同时做空白孔，阴性对照孔及阳性对照孔）。
　　3.　加酶标抗体：于各反应孔中，加入新鲜稀释的酶标抗体（经滴定后的稀释度）0.1ml。37℃孵育0.5～1小时，洗涤。
　　4.　加底物液显色：于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃10～30分钟。
　　5.　终止反应：于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml。
　　6.　结果判定：可于白色背景上，直接用肉眼观察结果：反应孔内颜色越深，阳性程度越强，阴性反应为无色或极浅，依据所呈颜色的深浅，以“+”、“-”号表示。也可测O?D值：在ELISA检测仪上，于450nm（若以ABTS显色，则410nm）处，以空白对照孔调零后测各孔O?D值，若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍，即为阳性。
　　方法二　用于检测未知抗体的间接法：　　　
1、用包被缓冲液将已知抗原稀释至1～10μg／ml，每孔加0.1ml，4℃过夜。
2、次日洗涤3次。加一定稀释的待检样品（未知抗体）0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时,洗涤。同时做空白、阴性及阳性孔对照于反应孔中，加入新鲜稀释的酶标第二抗体（抗抗体）0.1ml，37℃孵育30-60分钟，洗涤,zui后一遍用DDW（超纯水）洗涤。其余步骤同“双抗体夹心法”的4、5、6。
3.　加底物液显色：于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃10～30分钟。
4.　终止反应：于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml。
5.　结果判定：可于白色背景上，直接用肉眼观察结果：反应孔内颜色越深，阳性程度越强，阴性反应为无色或极浅，依据所呈颜色的深浅，以“+”、“-”号表示。也可测O?D值：在ELISA检测仪上，于450nm（若以ABTS显色，则410nm）处，以空白对照孔调零后测各孔O?D值，若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍，即为阳性。
试剂器材
　　1.　试剂
　　（1）　包被缓冲液（PH9.6 0.05M碳酸盐缓冲液）:
　　　　NaCO3　1.59克　NaHCO3　 2.93克　　加蒸馏水至1000ml　　
    （2）　洗涤缓冲液（PH7.4 PBS）：0.15M　KH2PO4 0.2克　Na2HPO4?12H2O　2.9克　NaCl  8.0克KCl 0.2克 Tween-20 0.05％ 0.5ml 加蒸馏水至1000ml
　　（3）　稀释液:牛血清白蛋白（BSA） 0.1克　加洗涤缓冲液至100ml　或以羊血清、兔血清等 血清与洗涤液配成5～10％使用。
　　（4）　终止液（2M H2SO4）：蒸馏水178.3ml，逐滴加入浓硫酸（98％）21.7ml。
　　（5）　底物缓冲液（PH5.0磷酸棗柠檬酸）:0.2M Na2HPO4（28.4克／L） 25.7ml　0.1M 柠檬酸（19.2克／L） 24.3ml　加蒸馏水50ml。
　　（6）　TMB（四甲基联苯胺）使用液:TMB（10mg／5ml无水乙醇） 0.5ml底物缓冲液（PH5.5） 10ml0.75％H2O2　32μl
　　（7）　ABTS使用液:ABTS　0.5mg　底物缓冲液（PH5.5） 1ml　3％H2O2　2μl
　　（8）　抗原、抗体和酶标记抗体。
　　（9）　正常人血清和阳性对照血清。
　　2.　器材:
　　（1）　聚苯乙烯塑料板（简称酶标板）40孔或96孔，ELISA检测仪，50μl及100μl加样器，塑料滴头，小毛巾，洗涤瓶。
　　（2）　小烧杯、玻璃棒、试管、吸管和量筒等。
　　（3）　4℃冰箱，37℃孵育箱。
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