更新时间:2022-08-27
鱼活性氧簇(ROS)ELISA试剂盒用于测定鱼血清、血浆及相关液体样本中活性氧簇(ROS)含量。
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鱼活性氧簇(ROS)ELISA试剂盒
使用说明书
本试剂盒仅供研究使用。
检测范围: 96T
12 IU/ml -360 IU/ml
使用目的:
本试剂盒用于测定鱼血清、血浆及相关液体样本中活性氧簇(ROS)含量。
实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中鱼活性氧簇(ROS)水平。用纯化的鱼活性氧簇(ROS)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入活性氧簇(ROS),再与HRP标记的活性氧簇(ROS)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过*洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成终的黄色。颜色的深浅和样品中的活性氧簇(ROS)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中鱼活性氧簇(ROS)浓度。
试剂盒组成
1 | 30倍浓缩洗涤液 | 20ml×1瓶 | 7 | 终止液 | 6ml×1瓶 |
2 | 酶标试剂 | 6ml×1瓶 | 8 | 标准品(720IU/ml) | 0.5ml×1瓶 |
3 | 酶标包被板 | 12孔×8条 | 9 | 标准品稀释液 | 1.5ml×1瓶 |
4 | 样品稀释液 | 6ml×1瓶 | 10 | 说明书 | 1份 |
5 | 显色剂A液 | 6ml×1瓶 | 11 | 封板膜 | 2张 |
6 | 显色剂B液 | 6ml×1/瓶 | 12 | 密封袋 | 1个 |
标本要求
1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融
2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
操作步骤
360 IU/ml | 5号标准品 | 150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液 |
180 IU/ml | 4号标准品 | 150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液 |
90 IU/ml | 3号标准品 | 150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液 |
45 IU/ml | 2号标准品 | 150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液 |
22.5 IU/ml | 1号标准品 | 150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液 |
计算
以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。
鱼活性氧簇(ROS)ELISA试剂盒注意事项
1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间建议控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
6.底物请避光保存。
7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9.本试剂不同批号组分不得混用。
保存条件及有效期
1.试剂盒保存:;2-8℃。
2.有效期:6个月