人高迁移率族蛋白B1酶联免疫试剂盒价格

人高迁移率族蛋白B1（HMGB-1）ELISA试剂盒资料：

规    格：（48T/96T） 

样品类型：血清、血浆、细胞培养上清等样品类型 
检测方法：酶联免疫法
特 异 性  ：公司ELISA试剂盒具有较高的灵敏度和出色的特异性 
交叉反应：由于当前的酶联免疫科学技术和知识有限，现有技术不可能完成药物检测的靶抗原之间和所有其他物种的类似物。因此，交叉反应可能仍然存在 
样 本 量 ：50-100 μL 
实验时间 ：1–4.5h 
储存条件 ：2-8°C 
储存方法 ：可以存储在2 - 8°C长达1个月（专家建议：4°C恒温保存，酶免试剂盒实验效果更佳）。对于长期存储,请在-20°C的存储。尽量保持试验板在密封铝箔袋，避免潮湿 
有 效 期：  6 months 

实验原理

本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人高迁移率族蛋白B1（HMGB-1）水平。用纯化的人高迁移率族蛋白B1（HMGB-1）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入高迁移率族蛋白B1（HMGB-1），再与HRP 标记的高迁移率族蛋白B1（HMGB-1）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过*洗涤后加底物TMB 显色。TMB 在HRP 酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的高迁移率族蛋白B1（HMGB-1）呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），通过标准曲线计算样品中人高迁移率族蛋白B1（HMGB-1）浓度。

试剂盒组成

1 30 倍浓缩洗涤液 20ml×1 瓶 7 终止液 6ml×1 瓶

2 酶标试剂 6ml×1 瓶 8 标准品（320μg/L） 0.5ml×1 瓶

3 酶标包被板 12 孔×8 条 9 标准品稀释液 1.5ml×1 瓶

4 样品稀释液 6ml×1 瓶 10 说明书 1 份

5 显色剂A 液 6ml×1 瓶 11 封板膜 2 张

6 显色剂B 液 6ml×1/瓶 12 密封袋 1 个
“人高迁移率族蛋白B1（HMGB-1）ELISA试剂盒"的四大特性
1．特异性强：不与其它细胞因子反应。
2．重复性好：板内、板间变异系数均小于10%。
3．稳定性高：实验效果很稳定。
4．超灵敏度：zui小的检测浓度小于1号标准品，稀释度和样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。

标本要求

1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融

2．不能检测含NaN3 的样品，因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。

“人高迁移率族蛋白B1（HMGB-1）ELISA试剂盒"具体操作方法
以双抗体夹心法为例展示：
1、双抗体夹心法检测抗原 
操作步骤如下： 
1）将特异性抗体与固相载体结合，形成固相抗体。洗涤除去尚未结
合的抗体及一些杂质。 
2）加入待测标本，保温反应。标本中的抗原与固相抗体结合，形成固相抗原抗体复合物。洗涤除去其他未结合物质。 
3）加酶标抗体，保温反应。固相免疫复合物上的抗原与酶标抗体结合。*洗涤未结合的酶标抗体。此时固相载体上带有的酶量与标本中受检抗原的量相关。 
4）加底物显色。固相上的酶催化底物成为有色产物。通过比色，测知标本中抗原的量。在临床检验中，此法适用于检验各种蛋白质等大分子抗原，例如 HBeAg、HBsAg、hCG 、AFP等。只要获得针对受检抗原的特异性抗体，就可用于包被固相载体和制备酶结合物而建立此法。如抗体的来源为抗血清，包被和酶标所使用的抗体分别取自不同种属的动物。如应用单克隆抗体，一般选择两个针对抗原上不同决定簇的单抗，分别用于包被固相载体和制备酶结合物。这种双位点夹心法具有很高的特异性，而且可以将受检标本和酶标抗体一起保温反应，作一步检测。
在一步法测定中，当标本中受检抗原的含量很高时，过量抗原分别和固相抗体及酶标抗体结合，而不再形成"夹心复合物"。类同于沉淀反应中抗原过剩的后带现象，此时反应后显色的吸光值（位于抗原过剩带上）与标准曲线（位于抗体过剩带上）某一抗原浓度的吸光值相同，如按常法测读，所得结果将低于实际的含量，这种现象被为钩状效应（hook effect），因为标准曲线到达高峰后呈钩状弯落。钩状效应严重时，反应甚至可不显色而出现假阴性结果。因此在使用一步法试剂测定标本中含量可异常增高的物质（例如血清中 HBsAg、AFP 和尿液 hCG 等）时，应注意可测范围的zui高值。用高亲和力的单克隆抗体制备此类试剂可削弱钩状效应。

注意事项

1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30 分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。

2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。

3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间控制在5 分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。

4． 请每次测定的同时做标准曲线，做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD 值大于标准品孔*孔的OD 值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n 倍）后再测定，计算时请zui后乘以总稀释倍数（×n×5）。

5． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

6．底物请避光保存。

7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.

8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。

9．本试剂不同批号组分不得混用。

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