恒远实验：勘测丙二醛的方法步骤

恒远实验：勘测丙二醛的方法步骤

    丙二醛被简称为MDA，它是常用的膜脂过氧化指标，在酸性和高温度条件下，可以与硫代巴比妥酸(TBA)反应红棕色的*川，其zui大吸收波长在532nm。
    在实验步骤之前我们要有一个相应的准备工作。首先，本次实验的原理得要了解一下，我们接着前面的来说明一下，测定植物组织中MDA时受多种物质的干扰，其中zui主要的是可溶性糖，糖与TBA显色反应产物的zui大吸收波长在450nm，但532nm处也有吸收。
    植物遭受干旱、高温、低温等逆境胁迫时可溶性糖增加，因此测定植物组织中MDA—TBA反应物质含量时一定要排除可溶性糖的干扰。低浓度的铁离子能够显著增加TBA与蔗糖或MDA显色反应物在532、450nm处的消光度值，所以在蔗糖、MDA与TBA显色反应中需一定量的铁离子，通常植物组织中铁离子的含量为每克千重100—300ug·g-1，根据植物样品量和提取液的体积，加入Fe3+的终浓度为0．5umol·L-1。
    以上为勘测丙二醛的实验原理，终于要进入测量的方法环节了，丙二醛的提取称取剪碎的试材1g，加入2mll0%TCA和少量石英砂，研磨至匀浆，再加8mlTCA研磨，匀浆在4000r·min-1离心10min，上清液为样品提取液。
    显色反应和测定 吸取离心的上清液2ml(对照加2ml蒸馏水)，加入2ml 0．6%TBA溶液，混匀物于沸水浴上反应15min，迅速冷却后再离心。取上清液测定532、600和450nm波长下的消光度。
勘测丙二醛的实验结果：