技术服务：相对定量SYBR Green I 染料法

                                                    相对定量SYBR Green I 染料法

　　荧光定量PCR技术，是指在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号的变化实时检测PCR扩增反应中每一个循环扩增产物量的变化，通过Ct值和标准曲线的分析对起始模板进行定量分析。康为世纪提供利用荧光定量PCR的方法对样品中的基因表达情况进行相对定量或定量分析的技术服务。
 

服务价格

服务内容
　　相对定量 （mRNA表达量分析）
　　基因表达的研究一般采用相对定量的方法。相对定量法必须对样品的目的基因和内参基因同时分别进行定量，然后求出对于内参基因的目的基因的相对量。通过对样品间的目的基因的相对量进行比较，可以对不同样品间的mRNA进行表达量分析。内参基因通常选用表达量相对恒定的Housekeeping Gene，如：GAPDH、β-actin等。通过同时对内参基因的实时检测，可以对样品之间由于起始细胞数不同、或RNA提取效率的不同等造成的RNA量误差进行校正，达到在严格意义上对样品之间的mRNA表达量进行分析之目的。

　　定量　　
　　定量首先必须构建与检测样品目的基因具有相同序列的标准品，本公司服务内容为采用TA克隆的方法构建标准品。使用已知浓度的标准品制作5个点以上的标准曲线后，可以使用标准曲线对未知浓度的检测样品进行量 （起始拷贝数）分析。

　　SYBR Green I 染料法
　　SYBR Green I 是一种与双链DNA小沟结合的荧光染料，SYBR Green I只与双链DNA结合才能发出荧光，而不掺入链中的SYBR染料分子不会发射任何荧光信号，荧光信号与双链DNA分子数成正比，随着扩增产物增加而增加，荧光信号的强度代表了反应体系中双链DNA分子的数量。以SYBR Green I作为检测信号的荧光定量PCR方法称为染料法。

　　TaqMan探针法
　　PCR扩增时在加入一对引物的同时加入一个特异性的荧光探针，该探针为一寡核苷酸，两端分别标记一个报告荧光基团和一个淬灭荧光基团。探针完整时，报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收；PCR扩增时，Taq酶的5’端－3’端外切酶活性将探针酶切降解，使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离，随着扩增循环数的增加，释放出来的荧光基团不断积累，因此荧光强度与扩增产物的数量呈正比关系，从而荧光监测系统可接收到荧光信号，即每扩增一条DNA链，就有一个荧光分子形成，实现了荧光信号的累积与PCR产物形成*同步。以Taqman探针作为检测信号的荧光定量PCR方法称为探针法。

服务优势
　　·先进的仪器，的试剂，专业的团队，实验结果更可靠。
　　·免费设计优化引物，使定量PCR反应扩增效率达到90%以上，使相对定量结果更可靠。

样品要求
　　客户需提供组织、细胞、血液等样品材料，或纯化好的总RNA或总DNA，反转录好的cDNA样品，具体要求如下：

终产品
　　·一对引物（上游引物和下游引物）及其序列；
　　·完整实验报告；
　　·
服务说明
　　·客户提供基因序列。
　　·如因实验材料等非本公司原因造成某实验步骤失败，使实验提前终止，已启动的实验项目仍正常收费。

上海恒远生物科技有限公司是一家立足于生命科学领域的解决方案提供商，全力打造高品质生物试剂产品链和技术服务链，致力于提供全方面的解决方案。目前建立了一系列技术服务平台。我们致力于每位客户的满意和成功，为客户提供zui有竞争力的产品和解决方案，持续为客户创造zui大价值。