四月技术总结交流ELISA标准曲线的绘制

     在绵绵春雨的伴随之下，四月已将近过半。在这个月中，您都有哪些收获呢？上海恒远公司结识了几位客户，并为山东大学齐鲁医院李老师、山西医科大学俞老师等客户解决实验技术问题。今天上午，我公司欧阳博士对四月技术做出总结，与大家交流ELISA标准曲线的绘制。
一、ELISA标准曲线绘制方法 
    ①ELISA实验中样品都要做复孔或三孔，然后计算每个浓度标准品的平均OD值，复孔的变异系数应该小于20%。
    ②平均OD值减去空白孔的OD值。
    ③制作标准曲线。
    以减去本底后的OD值为X轴，标准品的浓度为Y轴，利用作图软件得出一个合适的计算方法。建议使用合适的软件来作图，比如CurveExpert 1.4。这款软件能够给出很多种方法（比如直线、半对数、对数、四参数方程等）并从中选择一条zui合适的方程。要想检验某条曲线是否与表中数据吻合，可以将标准品的浓度作为未知数，将对应的OD值带入该方程，计算出标准品的浓度，得到的结果应该与实际浓度很接近（+/-10%）。选择拟合度zui高的那条曲线。
二、测定多个酶标板时是否可以使用同一条标准曲线？
    在测定不同板中的样品时，每一个板都对应一条标准曲线。技术错误或者不同的孵育情况，环境条件都会引起酶标板之间产生不同结果。一条标准曲线测定的样品值必需是在相同环境下产生的，否则就是无效值。 
三、温馨提示
    如果样品的OD值超过标准曲线的zui高值，在实验前应该先将样品稀释从而得到准确的浓度。样品的zui终度应该是计算出的浓度乘以稀释倍数。
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