ELISA试验中为什么要避免产生气泡

                    ELISA试验中为什么要避免产生气泡

通常气泡都是聚集在酶标板的孔周围，导致孔中液体不能与孔壁有效接触，使孔内反应不均一。

包被时有气泡的话，将导致包被不*实际包被量下降--弱阳性甚至假阴性。

封闭时有气泡的话，将导致大量未结合位点的存在，引起非特异性结合--本底增高，假阳性。

加样时有气泡的话，抗原抗体不能有效的结合--弱阳性甚至假阴性。

加二抗时有气泡的话，抗原抗体不能有效的结合--弱阳性甚至假阴性（竞争法相反----假阳性）。

加显色液时有气泡的话--－显色不*。

加终止液时有气泡的话，1。不能*终止反应 2。影响酶标仪比色，OD值增高

洗涤时有气泡的话，非特异性结合物不能*洗去，做无用功。

避免方法：

1。加样时尽量靠近孔底（不要接触孔底），用力均匀，不要过快过猛。

2。封闭时一定要加满孔，

3。洗涤时一定要加满孔(重要），气泡会浮上来zui终驱除。手工洗板时一定要吸干水分并用力拍干。