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上海恒远邀您来看ELISA测定结果分析方案

发布时间:2018-12-12   点击次数:691次

    日前上午,我公司钱经理收到浙江大学郑老师发来的qq会话 。郑老师表示:ELISA试剂盒的检测结果不理想,不知道是哪里出了问题。帮我看下是什么原因,我自己合成8个氨基酸的抗原短肽,和BSA耦连后免疫动物,1个月后用ELISA测定血清中针对抗原短肽的抗体滴度,具体步骤:用碳酸缓冲液溶解抗原短肽后包板,4度冰箱18小时, 再用1%OVA37度封闭2小时,洗板3次。待测血清用10%小牛血清倍比稀 释,37度温育1小时,洗板3次,加入二抗,37度温育40分钟,洗板3次 ,加TMB显色,结果比较诡异,阴性对照也显色了,且OD值和阳性差别不大。是什么原因呢?是洗板的问题吗?


    钱经理将问题转至技术部,上海恒远生物公司专业技术员回应, ELISA结果不理想原因可以根据这几个方面分析:
    1.洗板是否串孔,如串孔的话可能造成污染;你一抗、二抗 每次洗板时洗5遍以上。
    2.封闭液的问题,你说阴性对照也显色了,那主要的问题应该是封闭,应重新考虑用OVA封闭是否适合,如果OVA封闭效果不好的话 可以选择其他的封闭液。封闭液的选择园子里有很多相关的帖,你搜一下看看。
    3.建议ELISA试剂盒包被在37度两小时,这样的效果可能会好 一些。


    上海恒远生物公司为您提供BIM、R&D、TSZ品牌ELISA试剂盒,制备齐全,种属涉及人、大鼠、小鼠、猪、鸡、植物等。保证质量,*,提供全程技术指导服务,欢迎您致电我司钱经理咨询。

            

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