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原来ELISA吸光度值衰减可以这样巧妙应对
点击次数:498 发布时间:2018-02-07

     近日的王老师在操作ELISA试剂盒实验的时候发现了一个问 题,于是来电到了我公司的售后部门问道:加完显色液(购买)显色一定时间后,再加终止液(2M H2SO4,自己配制)后,立即测试其吸光度值,等过几分钟再测试吸光度值,发现两次测得的吸光度值发生衰减。第二次均小于*次。 并且,加终止液时,从*条加到第12条后,测试发现,吸光度值从1-12条逐级衰减。前提是这12条酶标板都是同一种产品,并且包被相同蛋白。

   

     经过我公司技术专员的一番分析解答后,王老师恍悟道:原来ELISA吸光度值衰减可以这样巧妙应对。

     

     其实具体的原因也很简单,有可能是显色液的质量不够好。一般情况下,终止反应后OD值的下降前期不是很明显。终止后,吸光度值是会随着时间衰减,所以一般是加完终止液后立即测,这样比较准。再次分析12条显示逐级递减的原因看看是否是:

 

① 显色时间调整,如果你现在的显色时间是10MIN,那调整到30MIN,再加终止液,观察上述现象是否出现。

 

② 终止液中加入少量甘油看下怎么样。

   

     建议您使用BIM品牌的ELISA试剂盒,显色时间是30分钟,终止后要求在30分钟内检测,加入终止液后,zui好在加入终止液后2到3分终内检测,这是OD值相对比较高。拟合值能达到四个9。

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